急性肝衰竭是臨床常見(jiàn)的嚴(yán)重肝病癥候群，常因嚴(yán)重的肝臟合成和代謝功能障礙，導(dǎo)致患者病情危重、進(jìn)展迅速，死亡率極高。目前尚缺乏治療的特效藥物。人參皂苷Rg1是人參中提取的主要活性成分之一，具有抗氧化應(yīng)激，抗炎，抗凋亡，神經(jīng)保護(hù)等藥理作用。研究發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg1可通過(guò)上調(diào)皮質(zhì)激素受體抑制核因子KB的表達(dá)來(lái)抑制肝臟炎癥反應(yīng)。近年又有研究報(bào)道內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在多種肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。研究顯示內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的肝細(xì)胞凋亡可能是急性肝衰竭作用機(jī)制之一。四氯化碳可誘導(dǎo)肝細(xì)胞發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，并介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡，參與急性肝衰竭的發(fā)生發(fā)展。本研究通過(guò)建立四氯化碳誘導(dǎo)的急性肝衰竭小鼠模型，驗(yàn)證人參皂苷Rg1對(duì)急性肝衰竭小鼠模型的有效性，并初步探討人參皂苷Rg1對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)的急性肝衰竭小鼠模型抗肝細(xì)胞凋亡的影響，以及與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激之間的關(guān)系。

       急性肝衰竭致病機(jī)制多而復(fù)雜，且尚未研究清楚 ，其中肝細(xì)胞大量凋亡是急性肝衰竭重要的發(fā)病機(jī)制之一。肝細(xì)胞凋亡的主要途徑包括經(jīng)典死亡受體途徑和線粒體凋亡途徑，目前研究表明急性肝衰竭是繼前兩條途徑之后的第3條介導(dǎo)凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，且在凋亡發(fā)生發(fā)展過(guò)程中扮演重要的角色。適度的急性肝衰竭可以激活細(xì)胞保護(hù)機(jī)制，激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶，以保護(hù)細(xì)胞，抵抗應(yīng)激。但持久或嚴(yán)重的急性肝衰竭可引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能損傷，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞損傷。急性肝衰竭致發(fā)生時(shí)激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上半胱氨酸蛋白酶12，誘導(dǎo)下游 caspase3等效應(yīng)分子的激活，獨(dú)立地介導(dǎo)細(xì)胞凋亡。在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)非應(yīng)激狀態(tài)下，家族同源蛋白轉(zhuǎn)錄因子呈低水平量表達(dá)，持續(xù)的急性肝衰竭使家族同源蛋白表達(dá)量增加，進(jìn)而誘導(dǎo)觸發(fā)B ax／Bad 系統(tǒng)，介導(dǎo)細(xì)胞凋亡。同時(shí)急性肝衰竭時(shí)可以磷酸化 c-Jun 氨基末端激酶誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。肝臟葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白是急性肝衰竭的標(biāo)志性蛋白，在急性肝衰竭發(fā)生時(shí)肝臟葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白表達(dá)持續(xù)升高。

       本研究結(jié)果顯示，四氯化碳腹腔注射后小鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、總膽紅素均有顯著升高，肝組織 H E染色較兩對(duì)照組有明顯的變性壞死，提示模型建立成功。T U N EL 法檢測(cè)模型組和治療組較兩對(duì)照均有明顯的細(xì)胞凋，且人參皂苷Rg1預(yù)防治療組較四氯化碳模型組肝細(xì)胞凋亡明顯減輕。人參皂苷Rg1預(yù)防處理后血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 、總膽紅素較四氯化碳模型組顯著降低，人參皂苷Rg1預(yù)防治療后使四氯化碳所致小鼠肝臟 炎癥反應(yīng)得到了改善 。說(shuō)明人參皂苷Rg1有減輕肝細(xì)胞炎癥的作用顯示凋亡相 關(guān)蛋白caspase3在四氯化碳模型組的表達(dá)量較人參皂苷Rg1預(yù)防治療組顯著增加。說(shuō)明人參皂苷Rg1在四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠肝衰竭模型中具有減輕肝細(xì)胞凋亡的作用，這與我們課題組前期研究基本一致。我們進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)腹腔注射四氯化碳后，模型組和治療組較兩對(duì)照組肝臟葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白、家族同源蛋白的mRNA水平及蛋白水平表達(dá)均有明顯的增加，表明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與了四氯化碳誘導(dǎo)小鼠急性肝衰竭的發(fā)生發(fā)展機(jī)制并發(fā)揮著重要作用。同時(shí)人參皂苷Rg1預(yù)防治療組與四氯化碳模型組相比，肝臟葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白、家族同源蛋白半胱氨酸蛋白酶12蛋白表達(dá)量均明顯有不同程度降低。提示人參皂苷Rg1抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可以改善四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠肝衰竭模型肝細(xì)胞炎癥反應(yīng)和損傷，減輕肝細(xì)胞凋亡，在肝臟損傷方面發(fā)揮重要作用。人參皂苷Rg1可能通過(guò)抑制四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠急性肝衰竭模型 中肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)信號(hào)分子進(jìn)而減輕肝細(xì)胞凋亡。研究發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg1可通過(guò)抑制JN K ／MAPK通路，保護(hù)肝細(xì)胞，改善肝缺血再損傷，這個(gè)結(jié)果也證明人參皂苷Rg1可以干預(yù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。但具體作用靶點(diǎn)需要進(jìn)一步研究確認(rèn)。

       綜上所述，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在四氯化碳誘導(dǎo)小鼠急性肝衰竭中發(fā)揮重要作用，人參皂苷Rg1預(yù)防處理后，可減輕肝細(xì)胞炎癥反應(yīng)和肝組織病理?yè)p傷，抑制肝細(xì)胞凋亡，改善肝功能。其作用機(jī)制可能通過(guò)抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)信號(hào)分子，改善肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激進(jìn)而減輕肝細(xì)胞凋亡。本研究結(jié)果提示人參皂苷Rg1可能通過(guò)多個(gè)作用靶點(diǎn)抑制肝臟炎癥反應(yīng)和肝細(xì)胞凋亡 ，實(shí)現(xiàn)保護(hù)肝臟功能的作用。

來(lái)源：中華肝臟病雜志2017年3月第25卷 第 3期 

作者：羅歡 黃文祥 陽(yáng)成 趙僉秋 劉舒 徐雅姝 劉成偉