國(guó)內(nèi)外眾多口腔流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果提示，齲病仍是危害口腔健康，影響人類生活質(zhì)量的高發(fā)病率疾病。目前用于去除牙菌斑的方法包括機(jī)械和化學(xué)方法，其中使用含氟制劑已成為齲病預(yù)防最常用的化學(xué)方法之一，但過(guò)多或不恰當(dāng)?shù)氖褂每蓪?dǎo)致人體慢性氟中毒。另外，氯己定是一種有效的廣譜抗生素，多年來(lái)一直被用于臨床和家庭，但也存在不可避免的不良反應(yīng)，如舌頭或牙齒染色、黏膜脫落和味覺(jué)感知變化。同時(shí)，抗生素治療往往會(huì)隨著細(xì)菌耐藥性的增加而降低療效。近年的研究證明五倍子、黃芩、厚樸、大黃等中藥能抑制齲病病原菌的生長(zhǎng)及產(chǎn)酸。迄今為止，科學(xué)家已經(jīng)篩選多種具有抗生物膜能力的天然植物提取物，然而超過(guò)３０００００種藥物仍需要進(jìn)行抗微生物潛力的檢測(cè)。本研究擬通過(guò)實(shí)驗(yàn)從多種人參提取物中篩選出了可以明顯抑制致齲菌生物膜形成的活性成分人參皂苷Rh2，針對(duì)Rh2突出的抗生物膜效果，將其應(yīng)用在體外和體內(nèi)多菌種致齲生物膜上，觀察抑制效果。本研究為研發(fā)安全、有效的防齲藥物提供了參考，對(duì)于全面提高人類口腔健康和全身健康水平有著重要的意義。

       人參皂苷是人參屬植物人參、西洋參和三七等植物中的主要有效成分，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明其具有極強(qiáng)的抗腫瘤作用，部分人參皂苷也被證實(shí)有一定的抗菌作用。本實(shí)驗(yàn)所用的人參皂苷Rh2為２０Ｓ－ＧｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅRh2，純度達(dá)99.345％。在過(guò)去的實(shí)驗(yàn)中，我們通過(guò)篩選發(fā)現(xiàn)了對(duì)變形鏈球菌生物膜有抑制作用的２－ＡＩ／Ｔ小分子化合物。 通過(guò)對(duì)比，本文發(fā)現(xiàn)Rh2對(duì)于變形鏈球菌生物膜的抑制作用較２－ＡＩ／Ｔ 更為明顯。Rh２不僅對(duì)單菌種致齲生物膜有抑制作用，且對(duì)混合致齲菌生物膜呈現(xiàn)典型的劑量依賴型抑制效果。眾所周知，生物膜是由微生物和胞外多糖等主要成分構(gòu)成。Rh２處理后的生物膜內(nèi)細(xì)菌和胞外基質(zhì)的含量均有所下降，表明Rh2對(duì)生物膜的抑制作用是通過(guò)同時(shí)影響細(xì)菌和基質(zhì)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。這些發(fā)現(xiàn)與其他天然提取物的抗生物膜作用研究結(jié)果有相同之處。有研究發(fā)現(xiàn)，蔓越莓多酚可以減少細(xì)菌胞外多糖的產(chǎn)生，并進(jìn)一步減少細(xì)菌生物膜的生成量，而對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)沒(méi)有影響。但由于微生物本身能夠產(chǎn)生細(xì)胞外聚合物質(zhì)，控制生物膜的關(guān)鍵是降低微生物的活性和相關(guān)代謝反應(yīng)從而減少胞外基質(zhì)的產(chǎn)生。

       在體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，對(duì)于齲壞程度的判斷，本文首先采用了無(wú)需破壞牙齒整體結(jié)構(gòu)的 Ｍｉｃｒｏ－ＣＴ掃描分析法來(lái)觀察，發(fā)現(xiàn)Rh2組磨牙剩余牙齒體積明顯大于空白對(duì)照組，說(shuō)明Rh2有較強(qiáng)的抗齲能力。而磨牙窩溝處平均密度高于空白對(duì)照組，這一結(jié)果從另外一 個(gè)角度反映了Rh2能夠阻止齲壞的進(jìn)展。繼而對(duì)大鼠上下頜骨進(jìn)行染色，根據(jù)經(jīng)典的大鼠齲病診斷及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)計(jì)分。齲壞的牙體組織因?yàn)槊摰V作用使硬組織的微小孔隙增多而更容 易被顯色劑染成紅色。與空白組相比，觀察到Rh2組的齲壞病損較小。本實(shí)驗(yàn)中齲齒診斷 評(píng)分和分析結(jié)果基本一致，都表明了Rh2可以有效減少大鼠牙齒的齲壞程度，控制齲齒的進(jìn)展。近來(lái)，研究者發(fā)現(xiàn)了特異性針對(duì)變形鏈球菌生物膜的化合物，并指出僅用低濃度的該化合物就能分散５０％的變形鏈球菌生物膜，而且這種化合物對(duì)血鏈球菌和戈登鏈球菌的生物膜沒(méi)有影響。該研究也提示，在后續(xù)篩選不同結(jié)構(gòu)的人參皂苷的過(guò)程中，需要關(guān)注能夠靶向針對(duì)致齲菌生物膜的化合物，這些新型的特異性抗致齲菌生物膜化合物對(duì)于齲病的控制將更有針對(duì)性且可以有效減少口腔菌群失調(diào)的發(fā)生率。對(duì)于人參皂苷Rh2的臨床實(shí)際應(yīng)用的前景，結(jié)合了國(guó)內(nèi)外最新的研究結(jié)果進(jìn)行了分析。隨著中藥提取和純化工藝和技術(shù)的發(fā)展，人參皂苷的不同成分均得到鑒定，純化工藝已經(jīng)相對(duì)成熟，它們的人體應(yīng)用安全性也有較為全面的評(píng)估。若能在安全應(yīng)用的前提下，保證其對(duì)致齲菌生物膜抑制或清除的效果，這將對(duì)人參皂苷抗齲產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)有著積極的指導(dǎo)和參考價(jià)值。 

       綜上，人參皂苷Rh2能夠在體外實(shí)驗(yàn)中抑制致齲菌生物膜的形成，并在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，證 實(shí)了Rh2增加了大鼠磨牙的抗齲能力，它有望成為一種用于防治齲病的天然植物來(lái)源的藥物。

來(lái)源：口腔醫(yī)學(xué)研究2018年12月第34卷第12期 

作者：曹茜茜 葉倩琳 周立波 樊明文 劉暢